Contribution à l'établissement de l'interactome de Brucella melitensis

Résumé

La protéomique, ou étude du protéome (ensemble des protéines d' un organisme donné), prend chaque jour de plus en plus d'importance. La protéomique dite classique se focalise sur la caractérisation des protéines directement à partir d'extraits cellulaires de l'organisme d'intérêt. La protéomique inverse, quant à elle, consiste à introduire puis à exprimer de façon hétérologue des gènes d'un organisme d'intérêt dans des hôtes cellulaires comme la bactérie Escherichia coli ou la levure Saccharomyces cerevisiae. Cette dernière approche s'avère particulièrement utile dans le cadre, par exemple, de l'étude d'interactions protéine-protéine. Nous l'avons donc utilisée pour amorcer l'étude de l'interactome de Brucella melitensis, bactérie pathogène vecteur de la brucellose, en vue d'établir une carte d'interactions protéineprotéine de cette espèce. La découverte de partenaires protéiques interagissant entre eux est essentielle à la compréhension des mécanismes cellulaires et contribue à modifier notre vision des phénomènes biologiques. Dans le cadre de ce travail, 39 ORFs ont été choisies pour leur capacité supposée à interagir sur base de données de la littérature ou en fonction de leur rôle biologique, puis ont été clonées dans des vecteurs d'expression par la technique de clonage GATEW A Y™. Les interactions protéine-protéine ont été mises en évidence par la technique du double-hybride au moyen de trois gènes rapporteurs. Treize interactions spécifiques ont ainsi été révélées à l 'issue de ce travail qui démontre donc l'efficacité de la méthode utilisée et la faisabilité de l'étude de l'interactome de B. melitensis à plus grande échelle, c'est-à-dire sur le protéome entier.

la date de réponse	2002
langue originale	Français
Superviseur	Jean VANDENHAUTE (Promoteur)