Construction d'une banque soustractive d'ADNc de cellules en suspension de tabac traitées avec des oligogalacturonides.

  • Miguel Monin

    Student thesis: Master typesMaster en sciences biologiques

    Résumé

    Les pectines sont des polysaccharides d'une grande importance pour la cellule végétale. Elles assument une fonction structurale et interviennent dans la régulation de la morphogenèse et dans les interactions plante-pathogène. Dans le cadre des interactions plante-pathogène, des oligogalacturonides (fragments de pectines) sont produits suite à l'action d'enzymes pectolytiques pathogènes. Ceux-ci sont capables de déclencher des réponses de défense de la part des cellules végétales. Les premières étapes de la transduction du signal pectique sont décrites, de même que les réponses physiologiques « macroscopiques » de défense. Les protagonistes moléculaires contrôlant cette transduction du signal ne sont pas encore totalement connus. Au cours de ce mémoire nous avons mis au point une procédure d'identification des intermédiaires de la transduction du signal pectique à l'aide d'une méthode de criblage différentiel le clonage soustractif d'ADNc. Des cellules de tabac BY-2 cultivées en suspension ont été stimulées pendant 6h par des oligogalacturonides de degré de polymérisation ³ 9. Les ARNm de ces cellules et de cellules non stimulées ont été isolés. Les ARNm commun aux deux populations ont été éliminés par hybridation soustractive ; les ARNm spécifiques de la stimulation ont été amplifiés par PCR et clonés. La banque soustractive d'ADNc a été caractérisée par séquençage des différents clones obtenus.
    la date de réponse1999
    langue originaleFrançais
    SuperviseurAnnabelle Decreux (Copromoteur) & Johan Messiaen (Promoteur)

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