Le quorum sensing est un système de communication bactérien, dépendant de la densité cellulaire, basé sur l'accumulation d'une phéromone diffusible appelée homosérine lactone. Les bactéries utilisent ce type de communication pour réguler divers comportements de groupe, comme l'émission de lumière, la conjugaison et la production de facteurs de virulence. La récente découverte d'un régulateur transcriptionnel (BabR) chez Brucella abortus et B. melitensis pose la question des rôles possibles du quorum sensing chez ces espèces. En effet, Brucella est une bactérie pathogène à tropisme intracellulaire dont la virulence est encore mal connue. Le but de ce travail est la création d'un mutant de babR, chez B. melitensis 16M, par deux méthodes parallèles : la délétion par une cassette de résistance à un antibiotique et la disruption intégrative par un plasmide portant un fragment interne du gène.Deux candidats intégrants ont été isolés. Leur génotype a été vérifié par PCR et analysé en Southern blotting avec une sonde interne à babR. Cette analyse montre que les deux intégrants ont disrupté le gène babR. Afin d'obtenir une première indication de l'importance relative de babR pour la virulence de Brucella, leur survie intracellulaire a été comparée à celle de la souche sauvage dans une infection ex vivo de cellules Hela. Suite à cette expérience préliminaire, un seul mutant babR montre une survie intracellulaire significativement moindre par rapport au sauvage. Ce mutant intégratif ainsi que le délétant en cours de construction ouvrent la porte au décryptage des cascades de régulation dépendantes du quorum sensing chez Brucella
Construction du mutant d'un régulateur transcriptionnel impliqué dans un système de communication bactérien chez Brucella melitensis 16M
Delory, M. (Auteur). 2000
Student thesis: Master types › Master en biochimie et biologie moléculaire et cellulaire