Approche moléculaire du syndrome humain de Waardenburg: clonage soustractif de gènes dérégulés dans le mutant murin correspondant SPLOTCH (Sp2H)

Résumé

La mutation Splotch (Sp2H) est une délétion de 32 nucléotides dans l'homéobox du gène Pax-3 chez la souris. Les souris homozygotes pour la mutation Sp2H ne sont pas viables et avortent spontanément au 14ème jour de leur vie embryonnaire. Ces embryons ne sont pas viables suite à un défaut dans la fermeture de leur tube neural. La présence de séquences paired et homéobox dans le gène Pax-3 suggère que la protéine Pax-3 est un facteur de transcription. L'objectif de ce mémoire est de tenter de cloner, par une approche soustractive, les gènes dont l'expression serait modifiée dans le mutant Splotch. La technique utilisée est celle qui opère la soustraction de molécules d'ADNc sur billes magnétiques (Coche, 1994). L'expérience de soustraction a été réalisée dans le sens sauvage moins Splotch et dans le sens inverse dans le but d'isoler, respectivement, les séquences qui seraient exprimées préférentiellement chez les souris sauvages ou homozygotes mutantes .. Cette approche nous a permis d'isoler des séquences qui sont apparemment exprimées de manière différentielle entre les deux types de souris. Il reste à démontrer que ces fragments de gènes sont impliqués dans la problématique de la fermeture du tube neural

la date de réponse	1994
langue originale	Français
L'institution diplômante	Universite de Namur