Sélection de peptides aptamères inhibiteurs de l'expression dépendante du couple régulateur-promoteur LuxR-pluxl

Résumé

De nombreux processus intracellulaires sont sujets à différentes formes de régulation. L'étude de ces régulations nécessite notamment des outils permettant d'inhiber spécifiquement l'activité des clés moléculaires de ces régulations. Les banques de peptides aptamères constituent à ce titre un système particulièrement intéressant. Au cours de ce travail, une banque de peptides aléatoires fusionnés à une protéine cytoplasmique a été utilisée pour sélectionner des peptides inhibiteurs de l'activité du régulateur transcriptionnel LuxR associé au phénomène de Quorum Sensing chez la bactérie luminescente Vibrio fischeri Deux systèmes permettant de sélectionner, au sein de la banque de peptides aléatoires, des peptides aptamères capables de modifier l'activité de ce régulateur ont été mis au point. Il s'agit du système rapporteur basé sur le gène toxique ccdB et celui basé sur le gène à toxicité conditionnelle pyrF. Ce dernier a permis de sélectionner deux peptides inhibant l'expression du gène pyrF placé sous la dépendance du promoteur pluxl et du régulateur LuxR. Ces mêmes peptides ont fait l'objet de tests basés sur la production de bioluminescence et se sont montrés capables d'inhiber cette production de luminescence. La détermination des séquences nucléotidiques encodant ces deux peptides nous a montré qu'ils sont de séquences identiques. La structure de l'extrémité carboxy-terminale de ce peptide montre des similitudes structurales à la N-(3-oxohexanoyl)-homosérine lactone, acyl-homosérine lactone inductrice de LuxR

la date de réponse	2001
langue originale	Français
Superviseur	Xavier De Bolle (Promoteur)