Mise en évidence du rôle de CREB dans l'expression différentielle de gènes induite par l'inhibition mitochondriale dans des préadipocytes 3T3-L1

  • Aurélia De Pauw

    Student thesis: Master typesMaster en sciences biologiques

    Résumé

    De nombreuses pathologies mitochondriales ont pour origine des mutations ou abérations dans les génomes nucléaire et mitochondrial. La conséquence ultime d'un dysfonctionnement mitochondrial est une inhibition des phosphorylations oxydatives. Parmi la multitude de symptomes observés dans les syndromes causés par des perturbations de l'activité bioénergétique des mitochondries, on retrouve une perturbation du métabolisme des lipides. Un concept récent, qui s'étend à de nombreux organites non fonctionnels, suggère que la cellule eucaryote de mammifère est capable de répondre à un tel dysfonctionnement. De plus, la communication moléculaire rétrograde qui s'établit entre la mitochondrie non fonctionnelle et le noyau induit souvent, in fine, un changement dans l'expression de nombreux gènes nucléaires. Au laboratoire, nous travaillons depuis plusieurs années sur la réponse de cellules préadipocytaires (3T3-Ll) à une inhibition des phosphorylations oxydatives mitochondriales induite par un traitement chronique en présence d'antimycine A, un inhibiteur du complexe III de la chaîne respiratoire. Dans ces conditions, on observe un phénotype cellulaire caractérisé par l'accumulation de nombreuses petites vésicules de triglycérides dans le cytosol. De plus, le facteur de transcription CREB, une protéine qui joue un rôle déterminant dans la différenciation adipocytaire, est phosphorylé et activé dans les préadipocytes incubés en présence de l'inhibiteur.Dans ce travail, nous avons caractérisé le phénotype obtenu en
    étudiant l'expression différentielle de gènes et avons recherché le rôle de CREB dans l'acquisition de vésicules de triglycérides dans des cellules incubées en présence d'antimycine A. Dans un premier temps, nous avons exploité un damier à ADNc développé à l 'URBC reprenant 89 sondes de capture pour des transcrits de gènes sélectionnés sur base de la littérature et connus pour leur fonction dans la différenciation adipocytaire ou adipogenèse. Des profils d'expression différentielle ont été établis sur des cinétiques et comparés à l'expression différentielle de gènes obtenue au cours de la différenciation des 3T3-Ll induite par un cocktail adipogénique et utilisé comme référence. Dans un deuxième temps, nous avons recherché le rôle éventuel du facteur de transcription CREB sur l'accumulation de triglycérides et sur la modification d'expression de gènes induites par l'antimycine A. Pour cela, nous avons exploité, validé et utilisé le système d'interférence par ARN (RNAi). Nous avons donc contribué à mieux comprendre l'effet d'une inhibition de l'activité mitochondriale sur l'expression différentielle de gènes dans des préadipocytes 3T3-Ll et avons pu montré que l' inhibition de l'expression de CREB bloque l'accumulation de triglycérides dans des préadipocytes incubés en présence de l'inhibiteur métabolique de l'activité mitochondriale.
    la date de réponse2004
    langue originaleAnglais
    SuperviseurThierry ARNOULD (Promoteur)

    Contient cette citation

    '