Mise au point d'une Biochip athérosclérose en modèle murin

Résumé

L'athérosclérose, maladie caractérisée par l'épaississement local de la paroi des artères de gros calibre, est la cause d'environ 50 % des décès aux USA. Ce processus dynamique fait intervenir les cellules endothéliales, les monocytes et les cellules musculaires lisses. Les mécanismes moléculaires à la base de la maladie ne sont pas encore complètement élucidés, mais on sait que les lipoprotéines athérogènes (LDL et VLDL), ainsi qu'une blessure endothéliale locale, jouent un rôle majeur. Ces deux facteurs contribuent à des stades précoces de la maladie, à modifier le comportement des cellules endothéliales, y compris au niveau de leur expression. Pour étudier ces changements d'expression, nous avons réalisé une chip expérimentale préliminaire « athérosclérose », à faible densité. Nous avons choisi de travailler en modèle murin car les souris transgéniques et knock-out sont des modèles in vivo de plus en plus utilisés en recherche dans le domaine de l'athérosclérose. En outre, il existe plusieurs lignées de cellules endothéliales murines qui, incubées en présence de . lipoprotéines athérogènes, telles les VLDL, s'activent. Pour réaliser cette chip, une vingtaine de séquences de messagers codant pour des protéines relevantes dans le cadre de l'athérogenèse, ont été sélectionnées. Des trappeurs correspondants ont été générés par RT-PCR et fixés sur verre. L'hybridation a été optimalisée avec des cibles pures biotinylées, également générées par PCR. Enfin, nous avons testé la biochip avec 12 trappeurs, sur de l' ARN total extrait de cellules endothéliales soumises ou non à des B-VLDL athérogènes

la date de réponse	2000
langue originale	Français
Superviseur	Jose REMACLE (Promoteur) & Martine Raes (Copromoteur)