Mise au point d'un modèle de Sénescence Induite Prématurément par un Stress unique, au t-BHP ou à l'éthanol, sur des fibroblastes humains diploïdes WI-38 et WI38/h-TERT

  • Simona Ghitescu

    Student thesis: Master typesMaster en sciences biologiques

    Résumé

    Des fibroblastes humains diploïdes jeunes de la souche WI-38 exposés à 5 stress subcytotoxiques répétés quotidiennement au tert-butyI hydroperoxyde (t-BHP) ou à l'éthanol présentent, deux à trois jours après le dernier stress, des biomarqueurs caractéristiques de cellules en Sénescence Réplicative (SR) (ex: activité S-A B-galactosidase, arrêt de
    prolifération, etc.). Ce phénomène est appelé la Sénescence Induite Prématurément par les Stress (SIPS). Notre travail a consisté en l'adaptation du modèle existant de SIPS induite par le t-BHP ou l'éthanol sur des fibroblastes humains pour mener à bien une étude fonctionnelle de certains gènes potentiellement impliqués dans l'apparition du phénotype sénescent lors de la SIPS. Dans un premier temps, nous avons mis au point un modèle de sénescence induite prématurément par un stress unique de 2 heures au t-BHP ou à l'éthanol chez des fibroblastes de la souche WI-38, qui pourra être utilisé pour l'analyse fonctionnelle de certains gènes surexprimés de manière transitoire dans ces cellules. Nous avons ensuite adapté ce modèle à des fibroblastes de la lignée de fibroblastes immortalisés WI-38/h-TERT de façon à pouvoir réaliser l'étude fonctionnelle envisagée par transfection stable.
    la date de réponse2004
    langue originaleFrançais
    SuperviseurOlivier TOUSSAINT (Promoteur)

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