Mise au point d'un damier prototype pour étudier l'expression de cellules monocytaires humaines en conditions pro-inflammatoires et pro-atherogènes

  • Sébastien Toffoli

    Student thesis: Master typesMaster en sciences biologiques

    Résumé

    L'athérosclérose, maladie caractérisée par un épaississement local de la paroi des artères musculaires et élastiques, est responsable de plus de 50% des décès dans le monde occidental. Les étapes initiales de cette pathologie sont caractérisées par un contexte inflammatoire dans lequel le monocyte joue un rôle central. Mais les études de son implication dans les étapes précoces de l'athérosclérose restent peu nombreuses. C'est pour ces raisons, que nous avons voulu étudier l'expression au niveau de l' ARN messager, de monocytes soumis à des conditions pro-inflammatoires ou pro-athérogènes, et ce au moyen d'un rnicrodamier à ADN prototype. Celui-ci est construit par une amplification PCR de fragments de séquences de gènes d'intérêt. Ces produits PCR sont spottés sur des lames de verre fonctionnalisées, afin de servir de sondes de capture pour des ADN complémentaires, obtenus par transcription inverse d' ARN messagers extraits de monocytes de la lignée cellulaire THP-1, stimulés ou non avec des lipopolysaccharides. En hybridant ces ADN complémentaires et après révélation en fluorescence et traitement statistique des résultats, nous observons bien des variations d'expression de gènes entre cellules stimulées et cellules contrôles. La caractérisation des patterns d'expression en conditions inflammatoires, puis en conditions pro-athérogènes à l'aide d'un damier plus élaboré, devrait nous permettre de mieux comprendre les étapes précoces de l'athérosclérose, mais aussi de détecter des anomalies monocytaires chez les patients hypercholestérolérniques avant même que des lésions athéromateuses ne soient apparentes
    la date de réponse2002
    langue originaleFrançais
    SuperviseurMartine Raes (Promoteur)

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