Les mécanismes responsables de la déméthylation globale du génome des cellules souches embryonnaires femelles de souris

Student thesis: Master typesMaster en biochimie et biologie moléculaire et cellulaire

Résumé

Une étude a montré une diminution de la méthylation de I' ADN dans les cellules souches embryonnaires femelles de souris lorsque celles-ci sont comparées à leurs homologues mâles. L'objectif du présent mémoire est de trouver les mécanismes qui sont impliqués dans cette hypométhylation de !'ADN. Plusieurs expériences ont été mises en place. Premièrement, nous avons voulu vérifier si les lignées de cellules souches embryonnaires femelles et mâles de notre laboratoire (gCl et El4TG2A) présentent un niveau de méthylation similaire à ce qui a été publié dans plusieurs études. Pour se faire, nous avons réalisé des études de pyroséquençage afin de comparer le niveau de méthylation de I' ADN entre les cellules mâles et femelles. Nous avons également réalisé des analyses d'expression del' ARN de plusieurs gènes pouvant avoir une importance majeure sur le niveau de méthylation de I' ADN. Deuxièmement, nous avons essayé de générer une lignée cellulaire de cellules souches embryonnaires mâles avec un rapporteur de méthylation. Cette lignée cellulaire nous aurait permis de suivre la méthylation de I 'ADN au cours du temps afin de réaliser un « screen » de I' ADN génomique de souris
contenant des gènes impliqués dans le processus de déméthylation. Finalement, nous avons essayé de développer une stratégie afin de retirer l'un des centres de l'inactivation du chromosome X dans des cellules souches embryonnaires femelles, afin d' étudier si cette région pouvait être impliqué dans la déméthylation de I 'ADN des cellules femelles.
la date de réponse2017
langue originaleFrançais
L'institution diplômante
  • Universite de Namur
SuperviseurOlivier De Backer (Promoteur)

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