Le rôle de la protéine TMEM45A dans la protection conférée par l'hypoxie contre l'effet des chimiothérapies anti-cancéreuses dans les cellules de carcinome rénal

Résumé

L'hypoxie tumorale est souvent associée à la chimiorésistance des cellules cancéreuses et à un mauvais pronostic pour les patients. Les adaptations cellulaires mis en place dans ces conditions ne sont pas encore claires, mais le facteur l inductible par l'hypoxie (HIF-1) est connu pour jouer un rôle majeur dans l'adaptation à l'hypoxie des cellules cancéreuses. Des études récentes visant à étudier les mécanismes sous-jacents ont permis d' identifier plusieurs gènes, parmi lesquels se trouve TMEM45A. TMEM45A est un gène de cible HIF-1 codant pour une protéine transmembranaire associée à l'appareil de Golgi . Très peu de données sont disponibles sur cette protéine mais son implication dans la protection conférée par l'hypoxie face aux agents chimiothérapeutiques a déjà été mise en évidence dans les cancers du sein et du foie. De plus, une corrélation entre TMEM45A et la sévérité du carcinome à cellules rénales (RCC) a également été rapportée. Dans cette étude, afin d'investiguer le rôle de TMEM45A dans la protection conférée
par l'hypoxie contre l'effet des agents chimiothérapeutiques dans le RCC, son expression a été invalidée dans des cellules de RCC4 par deux stratégies. Les résultats ont permis de confirmer la surexpression de TMEM45A en condition d' hypoxie dans ce modèle, de valider la localisation subcellulaire de la protéine et de mettre en évidence une protection face à l'agent chimiothérapeutique en hypoxie. Ils ont également montré une invalidation efficace mais non totale de TMEM45A dans des cellules transduites exprimant le shARN (short hairpin RNA) ciblant l 'ARNm de TMEM45A. Les cellules invalidées présentaient un taux de prolifération plus faible que les cellules contrôles mais, de façon inattendue, montraient également une sensibilité plus faible à l'apoptose induite par le cisplatine. Des expériences supplémentaires effectuées dans le but d' investiguer les mécanismes potentiels sous-jacents ont montré qu'un traitement au cisplatine induirait une activation différentielle de l'UPR suite à l' invalidation de TMEM45A. Dans un second temps, l'expression de TMEM45A a été invalidée par une autre technique: le système CRISPR-Cas9. Des analyses de fragments ont permis de confirmer cette nouvelle méthode d' invalidation malgré le faible nombre de mutants générés. Cependant, les effets phénotypiques observés au niveau de la prolifération et de la morphologie de certains clones
ne semblent pas liés à une mutation de TMEM45A. L'ensemble des résultats témoigne de l' implication de TMEM45A dans la chimiosensibilisation au cisplatine des cellules issues du RCC, suggérant son rôle dual dans la chimiosensibilité des cellules cancéreuses face aux agents chimiothérapeutiques.

la date de réponse	2018
langue originale	Français
L'institution diplômante	Universite de Namur
Superviseur	Carine Michiels (Promoteur)