Etude d'un biocapteur modèle par spectroscopie de génération de fréquence-somme

: Mémoire de DEA

Résumé

Dans ce mémoire, nous avons utilisé la spectroscopie de génération de fréquence-somme (SFG) pour étudier un biocapteur modèle basé sur l'interaction bien connue entre une protéine (avidine) et une vitamine (biocytine). Cette technique est idéale pour l'étude d'un tel système car elle est intrinsèquement sensible aux interfaces et permet d'obtenir une information vibrationnelle. Nous avons travaillé en deux étapes : premièrement, nous avons caractérisé la couche de biocytine et deuxièmement, nous avons étudié l'interaction entre celle-ci et différentes molécules cibles. Au cours de ces expériences, nous avons utilisé différents types de substrats, métalliques ou non. Dans un premier temps, nous avons étudié la biocytine adsorbée sur des substrats métalliques (Pt, Au, Ag) dans la gamme spectrale des modes d'élongation des C-H. L'observation de résonances démontre la formation d'une monocouche auto-assemblée de biocytine sur le substrat. Après immersion du capteur dans une solution d'avidine, les spectres ne changent pas. Cela signifie que nous ne détectons pas de manière significative la reconnaissance de la protéine. Dans un second temps, nous avons utilisé un prisme en fluorure de calcium (CaF2) comme substrat. Ce matériau est transparent de 0,2 à 7 µm et peut donc être utilisé dans une configuration en réflexion totale (TIR : total internal reflection). Nous avons investigué les gammes spectrales des modes d'élongation des C-H et des N-H. Pour la couche de biocytine, les résonances présentent une structure similaire à celles observées sur les substrats métalliques. Après interaction avec la protéine, des modifications drastiques sur les spectres SFG montrent la reconnaissance moléculaire. Dans une dernière étape, nous avons vérifié la capacité de notre technique à détecter la sélectivité du capteur en substituant l'avidine par de la bovidine (BSA) et par de l'avidine préalablement saturée avec de la biotine.

la date de réponse	2004
langue originale	Français
Superviseur	Paul THIRY (Promoteur), Laurent Dreesen (Jury), Guy Terwagne (Jury) & Patricia Renard (Jury)