Etude du trafic intracellulaire des hydrolases lysosomales dans les cellules exprimant la protéine Nef du virus de l'immunodéficience humaine de type 1

Résumé

Les virus de l’immunodéficience humaine de type 1 (HIV-1), de type 2 et le virus de l’immunodéficience simienne (SIV) ont développé des stratégies de détournement du trafic intracellulaire de protéines membranaires par l’intermédiaire d’une petite protéine multifonctionnelle de 27-35 kDa nommée Nef. Cet effet de Nef sur le trafic est étayé par le
fait que Nef induit une augmentation du nombre et de la taille de corps multivésiculaires dans les lymphocytes et dans les cellules HeLa. En fait, les effets de la protéine Nef seraient dus en grande partie à son interaction avec des composants essentiels du trafic intracellulaire, en particulier avec les complexes AP (clathrinadaptor proteins). Étant donné l’impact de l’expression de Nef sur le trafic intracellulaire d’un certain nombre de protéines et vu le rôle crucial des complexes AP dans le trafic intracellulaire des protéines lysosomales lors de leur biosynthèse, nous nous sommes demandé si l’expression de Nef ne pouvait pas interférer dans le trafic de ces hydrolases acides.
La première étape de ce mémoire a consisté à déterminer les conditions optimales de transfection pour les cellules HeLa, de manière à réaliser des expériences biochimiques avec un maximum de cellules exprimant la protéine Nef. Ensuite, après cette étape de mise au point, nos investigations sur les conséquences de l’expression de Nef sur le trafic
biosynthétique des hydrolases lysosomales ont pu débuter. L’ensemble de nos résultats semble indiquer que l’expression de Nef n’interfère pas de façon majeure avec le trafic des hydrolases lysosomales et des protéines membranaires, aussi bien dans les cellules HeLa que dans les cellules HEK 293 T. En effet, mis à part une légère diminution de l’abondance de la protéine LAMP-1 dans les cellules exprimant Nef WT, l’abondance, la maturation, l’activité enzymatique des hydrolases acides, et par conséquent le trafic biosynthétique des hydrolases étudiées ne semble pas être affecté dans ces mêmes cellules.

la date de réponse	2010
langue originale	Français
L'institution diplômante	Universite de Namur
Superviseur	Isabelle Hamer (Promoteur), Michel Jadot (Copromoteur) & Serge Bénichou (Copromoteur)