Etude des effets de l'invalidation du gène CLN2 codant pour la TriPeptidyl Peptidase 1 (TPP-1) sur la population mitochondriale

Résumé

Le déficit d’une activité enzymatique lysosomale peut mener à l’apparition d’une maladie de surcharge lysosomale (LSD) caractérisée par l’accumulation intra-lysosomale de matériel non dégradé. A l’heure actuelle, plus de 50 LSDs ont été décrites et ces pathologies sont généralement associées à des symptômes neuro-dégénératifs. Les Lipofuscinoses Ceroïdes Neuronales (NCLs) forment un groupe de LSDs caractérisées par l’accumulation lysosomale de céroïdes, un pigment auto-fluorescent. Parmi toutes les classes de NCLs, la Lipofuscinose Céroïde Neuronale Infantile Tardive (LINCL) est une maladie neuro-dégénérative causée par la déficience de l’enzyme TriPeptidyl Peptidase-1 (TPP-1) codée par le gène cln2. Tandis que l’origine de la pathologie est bien définie, il reste encore beaucoup d’inconnues concernant l’impact de la déficience en TPP-1 sur la biologie de la cellule. Néanmoins, il semblerait que l’accumulation de matériel non-dégradé au sein des lysosomes mène à l’activation de voies de signalisation susceptibles de modifier la fonction d’autres organites. Dans ce travail, nous nous sommes intéressés aux mitochondries et plus particulièrement aux effets potentiels d’une déficience en TPP-1 sur la morphologie et certaines fonctions mitochondriales dans des fibroblastes LINCL. Nous avons également étudié les effets éventuels d’une déficience en TPP-1 sur l’expression de gènes nucléaires codant pour des protéines mitochondriales. Nous montrons que l’abondance mitochondriale ne semble pas affectée par la déficience enzymatique dans les cellules LINCL. Par contre, nos résultats suggèrent que la morphologie des mitochondries est perturbée par la déficience en TPP-1 puisque le réseau mitochondrial de fibroblastes LINCL est plus fragmenté que dans des fibroblastes contrôles. De plus, alors que la déficience enzymatique ne semble pas affecter l’abondance des ROS mitochondriaux, les cellules LINCL présenteraient une concentration en calcium mitochondrial matriciel et un potentiel de membrane mitochondriale plus élevés, et un contenu en ATP plus important. Nos
résultats indiquent également que le gène codant la protéine pro-apoptotique Bnip3 semble surexprimé dans les fibroblastes LINCL, une protéine dont nous devrons déterminer la fonction dans les cellules déficientes en TPP-1.

la date de réponse	2012
langue originale	Français
L'institution diplômante	Universite de Namur
Superviseur	Thierry Arnould (Promoteur)