Etude de la mort cellulaire induite par une réponse antivirale ou un stress du réticulum endoplasmique dans les lignées lymphoïdes

Résumé

Le cancer est causé par la prolifération incontrôlée de cellules suite à de nombreuses altérations génétiques affectant notamment les voies de signalisation impliquées dans la croissance et la mort cellulaires. La majorité des thérapies anticancéreuses visent à induire l’apoptose des cellules cancéreuses, cependant, les cellules y deviennent de plus en plus résistantes. Heureusement, le concept d’apoptose ne représente pas le seul mécanisme pouvant mener à la mort cellulaire et d’autres types de mort émergent et doivent être pris en considération. Une meilleure compréhension des mécanismes d’apoptose et des modes alternatifs de mort cellulaire permettrait de déterminer de nouvelles cibles dans le but d’améliorer certaines thérapies actuelles. Nos recherches ont porté sur l’étude de la mort cellulaire induite lors d’une réponse antivirale ou lors d’un stress du réticulum endoplasmique (RE) dans des lignées lymphoïdes et plus particulièrement, les cellules T Jurkat. D’une part, nous nous sommes intéressés à décortiquer les mécanismes de l’activation de la kinase PKR (double stranded RNA-dependent kinase) par les caspases et à l’implication de RIP1 au cours de l’apoptose et de la nécrose induites par l’ARNdb (ARN double brin) dans les cellules T Jurkat. Nos résultats suggèrent que RIP1 est impliqué dans l’apoptose et la nécrose induite par l’ARNdb. Nous mettons aussi en évidence un nouveau mode d’activation de PKR dépendant des caspases au cours de l’apoptose. La PKR est clivée par les caspases en fragments N-terminal (PKR-ND) et C-terminal porteur du domaine kinase (PKR-KD). Ces deux fragments montrent des fonctions différentes. PKR-KD est capable de se lier et d’activer la PKR tandis que PKR-ND amplifie ce processus en facilitant l’interaction entre PKR-KD et la kinase PKR entière. D’autre part, nous avons étudié l’implication des caspases, des membres de la famille Bcl-2 et de RIP1 (receptor-interacting protein-1) dans l’apoptose et la nécrose induites par un stress du RE. Nous avons montré que les caspases-3, -8 et -9 jouent un rôle dans l’apoptose induite par la bréfeldine-A (BFA). Par l’utilisation de cellules Jurkat déficientes en caspase-8 et en FADD, nous avons montré que ces protéines sont redondantes dans ce processus apoptotique. Par contre, une surexpression de Bcl-2 augmente clairement la survie cellulaire et les cellules mourantes meurent par nécrose. De plus, les cellules Jurkat déficientes en caspase-8 semblent plus résistantes à la thapsigargine tandis que la surexpression de Bcl-2 n’a pas d’effet sur la cytotoxicité liée à cet inhibiteur, ce qui suggère que la BFA et la thaspigargine induisent des voies de signalisation de mort cellulaire différentes. En comparant l’abondance des protéines pro-apoptotiques de la famille Bcl-2 dans l’apoptose et la nécrose induite par la BFA, nous avons mis en évidence des différences de profil d’expression suggérant que ces protéines jouent un rôle dans la mort cellulaire induite par un stress du RE. En conclusion, les résultats obtenus apportent de nouvelles données dans la compréhension des mécanismes apoptotiques et nécrotiques induits par une réponse antivirale ou de stress du RE dans les lignées lymphoïdes. Les voies alternatives de mort cellulaire induite par l’ARNdb, plus particulièrement la PKR, et les voies induites par un stress du RE semblent des pistes intéressantes afin d’améliorer certains traitements contre le cancer

la date de réponse	20 août 2010
langue originale	Français
L'institution diplômante	Universite de Namur
Superviseur	Martine Raes (Promoteur), Thierry Arnould (Jury), Alex SAELENS (Jury), Isabelle Hamer (Président), Guy BERCHEM (Jury) & Michael KALAI (Copromoteur)