Développement d'un biochips pour le génotypage du complexe HLA de classe I locus A

Résumé

Le système HLA est, de part son extrême polymorphisme, une véritable carte d'identité biochimique sur les cellules de chaque individu. Il constitue la barrière biologique qui s'oppose aux transplantations tissulaires entre individus et fait de ses allèles des parfaits
marqueurs de susceptibilité ou de résistance à de nombreuses maladies. De par sa capacité à présenter des antigènes spécifiques de tumeur, il conditionne la vaccination anti-tumorale par des lymphocytes T cytotoxiques. L'identification des allèles HLA permet donc à la médecine d'être prédictive et préventive. Dans le cadre de ce mémoire, nous avons développé un outil rapide de typage des molécules HLA de classe I locus A qui permet tout d'abord d'amplifier en une seule PCR tous les allèles HLA-A. Ensuite, les produits amplifiés sont identifiés, par hybridation moléculaire, sur une biochips composées de sondes capteurs spécifiques de chacun des allèles. En effet, c'est la première fois que la technologie des biochips est appliquée à l'identification des allèles du complexe HLA de classe I. Enfin, la détection des hybrides formés est réalisée en fluorescence en présence de streptavidine liée à un fluorochrome. A ce stade du travail, nous parvenons à identifier, sans ambiguïté, l'allèle HLA * A02 qui est l'allèle le plus fréquemment rencontré dans les populations caucasiennes. Il reste maintenant à tester la spécificité des autres sondes capteurs et de réaliser une validation de la biochips HLA-A

la date de réponse	2001
langue originale	Français
Superviseur	Jose Remacle (Promoteur)