Contribution à l'étude du trafic intracellulaire de la cathepsine C humaine

Résumé

L'objectif de ce travail consiste en une première étape vers l'étude du trafic de la cathepsine C humaine. De nombreuses études sur la biosynthèse, la maturation et le trafic de diverses protéases lysosomales ont déjà été réalisées. Il reste cependant intéressant d'étudier la cathepsine C qui présente des particularités propres. Parmi les aspects les plus intéressants de la biosynthèse et du trafic des cathepsines lysosomales, notons le déroutage massif de certains précurseurs dans les milieux extracellulaires de plusieurs lignées tumorales. Les conséquences de ce déroutage ne sont pas connues avec précision. Les expériences de détection de la cathepsine C humaine par western blotting nous ont appris que si la procathepsine C est sécrétée dans les milieux de culture cellulaires testés, elle ne l'est que de façon peu efficace. Cette conclusion est à considérer avec prudence vu la difficulté avec laquelle nos western blotting ont révélé une sécrétion de procathepsine D dans les milieux. Par contre, lorsque l'utilisation d'une base faible (NRiCl) conduit à l'hypersécrétion attendue de la cathepsine D dans les cellules HepG2, nous n'observons toujours pas de signal extracellulaire pouvant correspondre à la procathepsine C. Si cette absence de sécrétion de la procathepsine C n'est pas liée à un problème dans la technique de détection, cette observation pourrait suggérer un mécanisme de transport de la procathepsine C particulièrement peu dépendant des récepteurs au mannose 6-phosphate. Nos expériences de marquage métabolique, concernant la sécrétion éventuelle de la procathepsine C, ne nous ont fourni que des résultats peu convaincants et ce pour deux raisons: premièrement, il nous est très difficile de détecter de façon univoque une forme moléculaire pouvant correspondre au précurseur, et deuxièmement, l'unique tentative de détection de la procathepsine C éventuellement libérée dans les milieux suite à l' incubation des cellules en présence de NH4Cl n'a pas donné de résultats concluants. Nos résultats semblent en tout cas indiquer que le comportement de la procathepsine C ne reproduit pas les observations concernant la cathepsine D rapportées dans la littérature et confirmées par notre travail

la date de réponse	2004
langue originale	Français
Superviseur	Michel Jadot (Promoteur)