Contribution à l'étude de la voie de biosynthèse de l'inule chez Chicorium intybus L.

Résumé

La chicorée industrielle (Cichorium intybus L.) produit de l'inuline dont le degré de polymérisation (DP) varie avec la saison. Les propriétés agro-alimentaires et l'intérêt qu'on porte à ce polyfructane dépendent directement de son DP. Les chaînes longues jouent le rôle de fibre, alors que les courtes ont un pouvoir sucrant peu calorique. Les voies de synthèse et de dégradation de l'inuline sont dès lors étudiées au niveau moléculaire. Le DP moyen de l'inuline diminue particulièrement suite à un stress au froid se produisant en arrière-saison. Cette modification peut s'expliquer par deux processus distincts, mais complémentaires : un ralentissement de la synthèse de l'inuline, et une augmentation de sa dégradation. L'étude concernant la dégradation étant par ailleurs en cours, notre travail envisage une modification de l'activité des deux enzymes principales intervenant dans la synthèse de l'inuline, à savoir la SST (sucrose : sucrose fructosyle transférase) et la FFT (fructose : fructose fructosyle transférase). La première partie du travail a consisté, pour chacun des deux gènes impliqués, à déterminer par RT-PCR semi-quantitative l'évolution de leur niveau de transcription au cours de la saison. Ces données, mises en graphique et corrélées aux courbes de températures, montrent une nette diminution de l'expression du gène de la SST lorsque les températures passent sous 0°C, alors que l'expression de la FFT est relativement stable tout au long de la saison. La deuxième partie du travail a été consacrée à l'étude du promoteur de la SST présentant une activité potentiellement dépendante du froid. Dans un premier temps, nous avons isolé ce promoteur grâce à la technique du Genome Walker. Ce promoteur, ainsi que des versions tronquées, a ensuite été placé devant le gène rapporteur GUS du plasmide binaire pBI121. Des plants de tabac et de chicorée ont été transformés par ces différentes constructions au moyen d'Agrobacterium tumefaciens. . .

la date de réponse	2002
langue originale	Français
Superviseur	Johan Messiaen (Copromoteur) & Pierre Van Cutsem (Promoteur)