MICROSCOPE-BL3

Le projet propose l’acquisition d’un microscope inversé, muni d’un système
de microfluidique pour la culture de bactéries individuelles d’une part, et la
culture de cellules mammifères d’autre part.
La question biologique principale de ce projet est centrée sur la croissance
de la bactérie pathogène Brucella abortus, en présence d’un ou plusieurs
agents stressants, ou à l’intérieur de cellules hôtes. L’équipement proposé
devrait permettre de suivre des bactéries individuellement et en temps réel
pour quantifier leur croissance et leur trafic intracellulaire. La croissance et
l’initiation de la réplication des chromosomes sera suivie grâce à des
souches de Brucella abortus produisant des rapporteurs fluorescents, qui
ont été préalablement mis au point au laboratoire. Nous pourrons donc
étudier la réaction des bactéries quant à la progression de leur cycle
cellulaire, dans différentes conditions de stress. Ces analyses tenteront
aussi de mettre en évidence l’hétérogénéité du devenir des bactéries
intracellulaires, nos données préliminaires indiquant que certaines bactéries
ne croissent pas dans les cellules hôtes. Ceci pourrait être une base de la
persistance bactérienne, corrélant avec le caractère chronique de l’infection
par Brucella abortus.
L’équipement proposé sera également ouvert à d’autres thématiques, telle
que l’analyse de la réponse de la bactérie modèle Caulobacter crescentus à
des métaux toxiques comme le cuivre.