Développement de nouveaux composés ciblant le facteur XIIa de la cascade de coagulation en utilisant des techniques microfluidiques innovantes dans le contexte d’une approche par fragments

Récemment, il est apparu que la voie de contact de la cascade de la
coagulation pouvait être une cible attractive pour le développement
d’agents antithrombotiques présentant un risque moindre d’hémorragie.
Des inhibiteurs du FXIIa, une protéase à sérine impliquée dans cette voie
de contact, pourraient donc constituer des outils thérapeutiques de choix.
Afin de développer ces inhibiteurs, nous allons appliquer une stratégie
basée sur les fragments. La première étape sera consacrée à l’identification
des fragments prometteurs. Dans cette optique, nous allons développer des
méthodes de criblage d’activité capable de mesurer des faibles affinités
allant du μM au mM. Ces méthodes s’appuieront sur les techniques
d’électrophorèse capillaire et thermophorèse à microéchelle. Parallèlement
à ces développements, nous construirons une librairie chimique de
fragments pouvant contenir jusqu’à 2000 molécules. Ces composés seront
choisis de manière à respecter des critères permettant d’assurer une bonne
diversité chimique, ainsi que des propriétés physicochimiques appropriées.
À ce stade, le criblage de notre librairie permettra de sélectionner les
fragments intéressants. À partir de ces derniers, nous allons générer de
nouveaux composés qui seront à leur tour évalués. Ce processus
d’optimisation sera guidé par les relations structure activité et sélectivité
dégagées expérimentalement et au moyen de techniques de conception
assistée par ordinateur. Ce cycle synthèse-évaluation sera réitéré jusqu’à la
découverte d’inhibiteurs puissants et sélectifs. L’activité biologique de nos
composés sera investiguée par (1) des tests enzymatiques effectués sur
enzyme isolée (à savoir la thrombine, le FXa, le complexe facteur
tissulaire/FVIIa, le FXIa , la kallicréine et le facteur XIIa), (2) des tests
fonctionnels de coagulation sur plasma ou sang total et (3) des modèles in
vivo de thrombose. À terme, ce projet permettra d’identifier les motifs
chimiques les plus utiles pour l’inhibition du FXIIa et générera des
composés pouvant servir d’outil pharmacologique pour l’étude de cette
protéase. Nous aurons également développé de nouvelles méthodes de
criblage de fragments.