Modification de domaines de liaison à la choline en vue de leur utilisation comme étiquette de purification de protéines recombinantes

Le but de ce travail est la création d'un petit polypeptide capable de se lier à un ligand sur colonne de chromatographie (tag de purification). Ce polypeptide mis en fusion avec un antigène d'intérêt permet la purification aisée de cet antigène. Il existe dans la nature des motifs répétés formant des domaines de liaison à un ligand : parmi ceux-ci, les domaines de liaison à la choline présentent un grand intérêt. En effet, la choline est un analogue du DEAE, couramment utilisé en chromatographie et la reconnaissance de ce ligand implique une liaison non-covalente, comme sur une colonne de purification. Le polypetide est recherché par délétions progressives du domaine C-terminal de l'amidase de Streptococcus pneumoniae (C-LytA) puis par des mutations dirigées, induites afin d'optimiser sa stabilité et son affinité.